Nuria's blog

1.OBJETIVO Visualizar las fibras de ADN que se encuentran en la saliva. 2.FUNDAMENTO El ADN se encuentra en el interior del núcleo celular, disperso, muy replegado y unido a proteínas formando la cromatina. Para poder extraerlo es necesario romper las células y separar el núcleo para después volver a romperlo y liberar el ADN. Cuando el ADN es liberado es necesario separarlo de las proteínas y provocar la precipitación de éstas para poder extraer el ADN. Extraeremos el ADN de una muestra de saliva, la cual en la boca arrastra las células del epitelio que recubre las paredes internas de la boca. Durante el enjuague el agua ha recogido las células epiteliales de la mucosa bucal. 3.MATERIAL Zumo de piña Detergente Sal Embudo Gradilla Tubo de ensayo Tapón 2 vasos de precipitado Agua destilada Alcohol 96º 4.PROCEDIMIENTO Prepararemos las dos disoluciones que mezclaremos con el espécimen de saliva:    Vaso 1:  10 cucharadas de  H 2 O  (agua destilad

1.OBJETIVO Observación de los cromosomas en el microscopio. 2.FUNDAMENTO El microscopio es una herramienta que permite observar objetos que son demasiado pequeños para ser observados a simple vista.  El más común es el microscopio óptico. Se trata de un instrumento óptico que contiene dos lentes que permiten obtener una imagen aumentada del objeto y que funciona por refracción. Usaremos un   tampón   pH 6'8 y el colorante   Giemsa .  La tripsina es una enzima que digiere las proteínas cromosómicas en un medio ácido con la finalidad de que los cromosomas se encuentren más extendidos sobre el portaobjetos.  3.MATERIAL Disolución de tripsina Colorante Giemsa Microscopio óptico Cubetas Coplin Tampón pH 6'8 4.PROCEDIMIENTO Vertemos la disolución tampón, el Giemsa y la disolución de tripsina en cubetas Coplin independientes y, una vez estén preparadas, las colocaremos en orden a lo largo de la superficie de trabajo. Primero la tripsina, después el tamp

1.OBJETIVO Obtener muestras de linfoblastos rotos cuyos cromosomas se encuentren extendidos y en metafase sobre los portaobjetos. 2.FUNDAMENTO El objetivo principal de la Citogenética es el diagnóstico de enfermedades genéticas, por lo que su principal herramienta para llevarlo a cabo es mediante el   cariotipo. El cariotipo es el conjunto de los cromosomas de una célula, de un individuo o de una especie, después del proceso en que se unen por pares de cromosomas idénticos y se clasifican según determinados criterios. Se expresa según una fórmula cromosómica determinada; este es el ejemplo de 46, XX (mujer sana). Nosotros realizaremos un cariotipo de sangre periférica que previamente hemos cultivado en medio RPMI 1640 al que le hemos añadido fitohemaglutinina para desdiferenciar los linfocitos a linfoblastos y proliferarlos. En ésta parte del cariotipo detendremos la mitosis en metafase mediante colchicina, un fármaco antimitótico que detiene o inhibe la división celular

1.OBJETIVO Realizar un cultivo celular de sangre periférica para que los linfocitos T proliferen. 2.FUNDAMENTO Un cultivo celular es el proceso mediante el que células pueden cultivarse en condiciones controladas. En esta ocasión vamos a cultivar una muestra de sangre humana para que los linfocitos T de la muestra proliferen y podamos realizarle el cariotipo. Para que las células se siembren, es preciso que tengan un medio de cultivo que las nutra: utilizaremos el medio de cultivo RPMI 1640. Además, también se tendrá que añadir en el cultivo fitohemaglutinina, la cual es una lectina que estimula la proliferación de linfocitos T y desdiferenciación a linfoblastos. 3.MATERIAL Micropipeta de rango de volúmenes 100 a 1000 microlitros. Gradilla. Tubo de hematología con heparina (verde). Medio de cultivo RPMI 1640. Fitohemaglutinina. 4.PROCEDIMIENTO Lo primero que debemos de hacer es introducir el medio de cultivo RPMI 1640 -que se encontrará congelado- en el bañ